Repositorio
Institucional

Miska, W

Villegas, J

Henkel, R

Folch, H

Sanchez, R

Schill, WB

Production and characterization of monoclonal antibodies to the major protein of boar outer dense fibers

ELSEVIER SCI IRELAND LTD

JOURNAL OF REPRODUCTIVE IMMUNOLOGY

en

Outer dense fibers (ODF) are structural elements in the mammalian sperm tail which surround the axoneme in the midpiece and principal piece and probably may help to maintain the elastic structures and elastic recoil of the sperm tail. In the present stud!, we have generated and characterized and describe a series of monoclonal antibodies (mAbs) against the 30 kDa major protein from boar ODF. For antibody screening an ELISA was developed using a newly developed method to fix the ODF proteins to the solid phase. A total of seven mAbs were selected and characterized by ELISA, Western blot and immunofluorescence. The mAbs recognize the major protein component of boar ODF on preparative Western blot and mark the mid- and principal piece of demembranated flagella. These mAbs also recognize the mid- and principal piece of demembranated human spermatozoa from normozoospermic patients, but not from those with asthenozoospermia. For the first time, we succeeded in obtaining hybridoma cell lines that secrete mAbs of class IgM, which react with the 30 kDa protein of boar ODF. (C) 1998 Elsevier Science Ireland Ltd. All rights reserved.#Las fibras densas externas (FDE) son elementos estructurales de la cola del espermatozoide de mamíferos que rodean el axonema en la pieza media y la pieza principal, y probablemente contribuyen a mantener las estructuras elásticas y la retracción elástica de la cola del espermatozoide. En el presente estudio, hemos generado, caracterizado y descrito una serie de anticuerpos monoclonales (AcM) contra la proteína principal de 30 kDa de las FDE del jabalí. Para la selección de anticuerpos, se desarrolló un ELISA utilizando un método recientemente desarrollado para fijar las proteínas de las FDE a la fase sólida. Se seleccionaron un total de siete AcM, que se caracterizaron mediante ELISA, Western blot e inmunofluorescencia. Los AcM reconocen el componente proteico principal de las FDE del jabalí en un Western blot preparativo y marcan la pieza media y la pieza principal de los flagelos desmembranados. Estos AcM también reconocen la pieza media y la pieza principal de los espermatozoides humanos desmembranados de pacientes normozoospérmicos, pero no de aquellos con astenozoospermia. Por primera vez, logramos obtener líneas celulares de hibridoma que secretan anticuerpos monoclonales de clase IgM, los cuales reaccionan con la proteína de 30 kDa de la ODF del jabalí. © 1998 Elsevier Science Ireland Ltd. Todos los derechos reservados.

artículo original

10.1016/S0165-0378(98)00037-0

outer dense fibers

monoclonal antibodies

boar spermatozoa

fibras densas externas

anticuerpos monoclonales

espermatozoides de verraco

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monoclonal antibodies

boar spermatozoa

fibras densas externas

anticuerpos monoclonales

espermatozoides de verraco

HUMAN SPERMATOZOA

MAMMALIAN SPERM

RAT SPERMATOZOA

TAIL

RNA

ESPERMATOZOIDES HUMANOS

ESPERMATOZOIDES DE MAMÍFEROS

ESPERMATOZOIDES DE RATA

COLA

ARN

Biología Celular

Biología Molecular

Ciencia Animal y lechería

Version publicada

Production and characterization of monoclonal antibodies to the major protein of boar outer dense fibers

JOURNAL OF REPRODUCTIVE IMMUNOLOGY

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ELSEVIER SCI IRELAND LTD

0165-0378

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91

Immunology

Reproductive Biology

WOS:000077205100005