PURIFICATION AND PROPERTIES OF PYRUVATE-KINASE FROM THE STRIATED-MUSCLE OF THE ICE-FISH CHAENOCEPHALUS-ACERATUS LOENBERG

Primer Autor
ZAMORA, JM#
Co-autores
ROSA, R
ROSA, CD
BIANCONCINI, MSC
BACILA, M
Título
PURIFICATION AND PROPERTIES OF PYRUVATE-KINASE FROM THE STRIATED-MUSCLE OF THE ICE-FISH CHAENOCEPHALUS-ACERATUS LOENBERG
Editorial
PERGAMON-ELSEVIER SCIENCE LTD
Revista
INTERNATIONAL JOURNAL OF BIOCHEMISTRY
Lenguaje
en
Resumen
1. Pyruvate kinase from the striated muscle of Chaenocephalus aceratus was purified to homogeneity by a 3-step process, 1 step involving ammonium sulfate precipitation and 2 steps with phosphocellulose and KCl and phosphoenolpyruvate elution. The final specific activity of the enzyme was 188.8 UI/mg and the overall yield 20%. The apparent molecular weights of the native enzyme suggests that the protein is present as a homotetramer. 2. The cellulose acetate electrophoresis showed the presence of only 1 isoenzymatic form with electrophoretic mobility similar to that of the L type PK from rat liver. 3. The enzyme possesses an optimal pH around 6.5 and an energy of activation of 15,000 cal/mol. Among 6 different buffers used, imidazole-HCl was the only one which did not interfere with the enzyme activity. Furthermore, this buffer showed to be the most efficient one in stabilizing the PK at 40-degrees-C for 30 min.#1. La piruvato quinasa del músculo estriado de Chaenocephalus aceratus se purificó hasta la homogeneidad mediante un proceso de 3 pasos: 1 paso con precipitación de sulfato de amonio y 2 pasos con fosfocelulosa y KCl y elución de fosfoenolpiruvato. La actividad específica final de la enzima fue de 188,8 UI/mg y el rendimiento global del 20 %. Los pesos moleculares aparentes de la enzima nativa sugieren que la proteína está presente como un homotetrámero. 2. La electroforesis en acetato de celulosa mostró la presencia de solo una forma isoenzimática con movilidad electroforética similar a la de la PK tipo L del hígado de rata. 3. La enzima posee un pH óptimo alrededor de 6,5 y una energía de activación de 15 000 cal/mol. Entre los 6 tampones diferentes utilizados, el imidazol-HCl fue el único que no interfirió con la actividad enzimática. Además, este tampón demostró ser el más eficiente para estabilizar el PK a 40 grados C durante 30 minutos.
Tipo de Recurso
artículo original
doi
10.1016/0020-711X(92)90135-N
Palabras Claves
REGULATORY PROPERTIES
ISOZYMES
ELECTROPHORESIS
TISSUES
FORMS
RAT
PROPIEDADES REGULADORAS
ISOZIMAS
ELECTROFORESIS
TEJIDOS
FORMAS
RATA
Ubicación del archivo
http://dx.doi.org/10.1016/0020-711X(92)90135-N
Materias
REGULATORY PROPERTIES
ISOZYMES
ELECTROPHORESIS
TISSUES
FORMS
RAT
PROPIEDADES REGULADORAS
ISOZIMAS
ELECTROFORESIS
TEJIDOS
FORMAS
RATA
Disciplinas de la OCDE
Bioquímica
Biología Marina y Limnología
Zoología, Ornitología, Entomología y Comportamiento Biológico
Versión del recurso (Recomendado-único)
Version publicada
Título de la cita (Recomendado-único)
PURIFICATION AND PROPERTIES OF PYRUVATE-KINASE FROM THE STRIATED-MUSCLE OF THE ICE-FISH CHAENOCEPHALUS-ACERATUS LOENBERG
Revista/Libro
INTERNATIONAL JOURNAL OF BIOCHEMISTRY
Tipo de ruta
hibrida
verde
Access Rights
restringido
Derechos de acceso
restringido
Idioma
en
Identificador del recurso (Mandatado-único)
artículo original
Editorial
PERGAMON-ELSEVIER SCIENCE LTD
ISSN
0020-711X
Página de inicio (Recomendado-único)
1833
Página final (Recomendado-único)
1840
Categoría WOS
Biochemistry & Molecular Biology
Id de Web of Science
WOS:A1992JW23400023
Colecciones
Colección Publicaciones Científicas
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