Repositorio UFRO · Omeka S

Proteasome activity and proteasome subunit transcripts in human spermatozoa separated by a discontinuous Percoll gradient

Primer Autor	Morales, P.
Co-autores	Rosales, O. Opazo, C. Diaz, E. S. Villegas, J. V. Sanchez, R.
Título	Proteasome activity and proteasome subunit transcripts in human spermatozoa separated by a discontinuous Percoll gradient
Editorial	WILEY
Revista	ANDROLOGIA
Lenguaje	en
Resumen	Human semen is composed of a heterogeneous population of spermatozoa with varying degrees of structural and functional differentiation and normality, which result in subpopulations of different quality. Using a discontinuous Percoll gradient, we separated three subsets of spermatozoa (65/45%, 90/65% and 90% fractions) from normozoospermic semen samples from healthy donors and proceeded to characterise their morphology, viability, motility and proteasome activity. In addition, the presence of proteasome subunit transcripts was investigated using reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). The results obtained showed significant differences in sperm motility, viability and morphology between the cells collected from each of the fractions. In particular, normal sperm morphology was 4.5 times higher in the 90% pellet in comparison with the 65/45% interface. In addition, there were significant differences in proteasomal activity between spermatozoa recovered from the 90% pellet and spermatozoa recovered from the 65/45% interface. Finally, there was a positive correlation between sperm proteasomal enzymatic activity and sperm motility and normal morphology after separation by a discontinuous Percoll gradient. The results of the RT-PCR revealed the presence of transcripts for the proteasome subunits beta 1, beta 2 and beta 5 in the human spermatozoa analysed. In conclusion, poor quality spermatozoa isolated from a Percoll gradient display an intrinsic proteasome activity deficiency, which may be associated with their low fertilising potential.#El semen humano está compuesto por una población heterogénea de espermatozoides con distintos grados de diferenciación estructural y funcional, lo que da lugar a subpoblaciones de diferente calidad. Mediante un gradiente discontinuo de Percoll, separamos tres subconjuntos de espermatozoides (fracciones 65/45%, 90/65% y 90%) de muestras de semen normozoospérmico de donantes sanos y procedimos a caracterizar su morfología, viabilidad, motilidad y actividad del proteasoma. Además, se investigó la presencia de transcritos de subunidades del proteasoma mediante reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa (RT-PCR). Los resultados obtenidos mostraron diferencias significativas en la motilidad, viabilidad y morfología de los espermatozoides entre las células recolectadas de cada una de las fracciones. En particular, la morfología normal de los espermatozoides fue 4,5 veces mayor en el sedimento del 90% en comparación con la interfase 65/45%. Además, se observaron diferencias significativas en la actividad del proteasoma entre los espermatozoides recuperados del sedimento al 90 % y los recuperados de la interfase 65/45 %. Finalmente, se encontró una correlación positiva entre la actividad enzimática del proteasoma espermático y la motilidad y morfología normales de los espermatozoides tras la separación mediante un gradiente discontinuo de Percoll. Los resultados de la RT-PCR revelaron la presencia de transcritos para las subunidades beta 1, beta 2 y beta 5 del proteasoma en los espermatozoides humanos analizados. En conclusión, los espermatozoides de baja calidad aislados mediante un gradiente de Percoll presentan una deficiencia intrínseca en la actividad del proteasoma, lo que podría estar asociado a su bajo potencial fertilizante.
Tipo de Recurso	artículo original
Description	This work was supported by Fondo Nacional de Ciencia y Tecnologia de Chile, FONDECYT 1080028 (P.M.) and Direccion de Investigacion, Universidad de La Frontera, DI09-1006 (J.V.). This work was supported by Fondo Nacional de Ciencia y Tecnologia de Chile, FONDECYT 1080028 (P.M.) and Direccion de Investigacion, Universidad de La Frontera, DI09-1006 (J.V.).
doi	10.1111/j.1439-0272.2009.01029.x
Formato Recurso	pdf
Palabras Claves	Chymotrypsin-like activity proteasome proteasome transcripts sperm morphology invitro fertilization sperm proteasomes 26s proteasomes participation morphology rna degradation proteolysis features nucleus Actividad similar a la quimotripsina proteasoma transcritos del proteasoma morfología del esperma fertilización in vitro proteasomas del esperma proteasomas 26S participación morfología ARN degradación proteólisis características núcleo
Ubicación del archivo	http://dx.doi.org/10.1111/j.1439-0272.2009.01029.x
Materias	Chymotrypsin-like activity proteasome proteasome transcripts sperm morphology invitro fertilization sperm proteasomes 26s proteasomes participation morphology rna degradation proteolysis features nucleus Actividad similar a la quimotripsina proteasoma transcritos del proteasoma morfología del esperma fertilización in vitro proteasomas del esperma proteasomas 26S participación morfología ARN degradación proteólisis características núcleo
Disciplinas de la OCDE	Andrología#Biología Reproductiva#Urología y Nefrología
Título de la cita (Recomendado-único)	Proteasome activity and proteasome subunit transcripts in human spermatozoa separated by a discontinuous Percoll gradient
Revista/Libro	ANDROLOGIA
Tipo de ruta	suscripción
Access Rights	restringido
Derechos de acceso	restringido
Identificador alternativo	PMID 21382064
Idioma	en
Identificador del recurso (Mandatado-único)	artículo original
Versión del recurso (Recomendado-único)	versión publicada
Entidad financiadora	ANID CONICYT FONDECYT 1080028 UFRO DI DI09-1006
Referencia del Financiador (Mandatado si es aplicable-repetible)	ANID CONICYT FONDECYT 1080028 UFRO DI DI09-1006
Editorial	WILEY
ISSN	0303-4569
Página de inicio (Recomendado-único)	106
Página final (Recomendado-único)	113
Categoría WOS	Andrology Andrología
Formato	pdf
Id de Web of Science	WOS:000288127700004