Vitrification of Human ICSI/IVF Spermatozoa Without Cryoprotectants: New Capillary Technology

Primer Autor
Isachenko, V.
Co-autores
Maettner, R.
Petrunkina, A. M.
Sterzik, K.
Mallmann, P.
Rahimi, G.
Sanchez, R.
Risopatron, J.
Damjanoski, I.
Isachenko, E.
Título
Vitrification of Human ICSI/IVF Spermatozoa Without Cryoprotectants: New Capillary Technology
Editorial
AMER SOC ANDROLOGY, INC
Revista
JOURNAL OF ANDROLOGY
Lenguaje
en
Resumen
The aim of this study was to develop and to test the standardized aseptic technology of permeable cryoprotectant-free vitrification of human spermatozoa in capillaries (for intracytoplasmic sperm injection [ICSI] or in vitro fertilization [IVF]). To test the effect of vitrification on basic sperm parameters, each of 68 swim-up prepared ejaculates from oligo-astheno-terato-zoospermic patients were aliquoted and distributed into 3 groups: 1) nontreated control, 2) 10 mu L of spermatozoa cryopreserved by slow conventional freezing with glycerol-contented medium, and 3) 10 mu L of spermatozoa vitrified in 50-mu L plastic capillaries in culture medium with 0.25 M sucrose. Spermatozoa motility (1, 24, and 48 hours after warming), plasma membrane integrity, acrosomal integrity, and spontaneous capacitation-like changes were determined after warming. Aseptic cryoprotectant-free vitrification showed a significantly stronger cryoprotective effect compared with conventional freezing. One hour after warming, motility, plasma membrane integrity, and acrosomal integrity were significantly higher than is observed for conventionally frozen spermatozoa (28% vs 18%, 56% vs 22%, and 55% vs 21%, respectively; P < .05), although lower than in fresh spermatozoa (35%, 96%, and 84%, respectively; P < .05). Capacitation-like changes did not differ significantly between vitrified and conventionally frozen samples (8% vs 9%, respectively; P > .1) (2% in fresh spermatozoa). The newly developed technology of aseptic vitrification of human spermatozoa in capillaries can effectively preserve these cells from cryo-injures. Spermatozoa, vitrified by this technology, are free from seminal plasma owing to swim-up preceding vitrification and are free from permeable cryoprotectants. They are ready for further use immediately after warming without any additional treatment. Therefore, the reported technology has a great potential for use in ICSI/IVF.#El objetivo de este estudio fue desarrollar y probar la tecnología aséptica estandarizada de vitrificación sin crioprotector permeable de espermatozoides humanos en capilares (para inyección intracitoplasmática de espermatozoides [ICSI] o fertilización in vitro [FIV]). Para probar el efecto de la vitrificación en los parámetros espermáticos básicos, cada uno de los 68 eyaculados preparados por swim-up de pacientes oligo-asteno-terato-zoospérmicos se alicuotó y distribuyó en 3 grupos: 1) control no tratado, 2) 10 μL de espermatozoides criopreservados por congelación convencional lenta con medio que contiene glicerol, y 3) 10 μL de espermatozoides vitrificados en capilares de plástico de 50 μL en medio de cultivo con 0,25 M de sacarosa. La motilidad de los espermatozoides (1, 24 y 48 horas después del calentamiento), la integridad de la membrana plasmática, la integridad acrosomal y los cambios espontáneos similares a la capacitación se determinaron después del calentamiento. La vitrificación aséptica sin crioprotectores mostró un efecto crioprotector significativamente mayor en comparación con la congelación convencional. Una hora después del calentamiento, la motilidad, la integridad de la membrana plasmática y la integridad acrosomal fueron significativamente mayores que las observadas en los espermatozoides congelados convencionalmente (28 % frente a 18 %, 56 % frente a 22 % y 55 % frente a 21 %, respectivamente; P < 0,05), aunque menores que en los espermatozoides frescos (35 %, 96 % y 84 %, respectivamente; P < 0,05). Los cambios similares a la capacitación no difirieron significativamente entre las muestras vitrificadas y las congeladas convencionalmente (8 % frente a 9 %, respectivamente; P > 0,1) (2 % en los espermatozoides frescos). La tecnología recientemente desarrollada de vitrificación aséptica de espermatozoides humanos en capilares puede preservar eficazmente estas células de las lesiones por crioconservación. Los espermatozoides vitrificados mediante esta tecnología están libres de plasma seminal gracias al proceso de migración ascendente previo a la vitrificación y de crioprotectores permeables. Están listos para su uso inmediatamente después de la descongelación, sin necesidad de ningún tratamiento adicional. Por lo tanto, la tecnología descrita tiene un gran potencial para su uso en ICSI/FIV.
Tipo de Recurso
Artículo original
doi
10.2164/jandrol.111.013789
Formato Recurso
pdf
Palabras Claves
Sin crioprotectores
motilidad
membrana
acrosoma
Cryoprotectant-free
motility
membrane
acrosome
ESPERMATOZOIDES HUMANOS
SEMEN HUMANO
CAPACITACIÓN INDUCIDA
ESPERMATOZOIDES DE JARABE
NITRÓGENO LÍQUIDO
INTEGRIDAD DEL ADN
CRIOCONSERVACIÓN
MOTILIDAD
VAPOR
FOSFATIDILSERINA
HUMAN SPERM
HUMAN SEMEN
INDUCED CAPACITATION
BOAR SPERMATOZOA
LIQUID-NITROGEN
DNA INTEGRITY
CRYOPRESERVATION
MOTILITY
VAPOR
PHOSPHATIDYLSERINE
Ubicación del archivo
http://dx.doi.org/10.2164/jandrol.111.013789
Materias
Sin crioprotectores
motilidad
membrana
acrosoma
Cryoprotectant-free
motility
membrane
acrosome
ESPERMATOZOIDES HUMANOS
SEMEN HUMANO
CAPACITACIÓN INDUCIDA
ESPERMATOZOIDES DE JARABE
NITRÓGENO LÍQUIDO
INTEGRIDAD DEL ADN
CRIOCONSERVACIÓN
MOTILIDAD
VAPOR
FOSFATIDILSERINA
HUMAN SPERM
HUMAN SEMEN
INDUCED CAPACITATION
BOAR SPERMATOZOA
LIQUID-NITROGEN
DNA INTEGRITY
CRYOPRESERVATION
MOTILITY
VAPOR
PHOSPHATIDYLSERINE
Título de la cita (Recomendado-único)
Vitrification of Human ICSI/IVF Spermatozoa Without Cryoprotectants: New Capillary Technology
Revista/Libro
JOURNAL OF ANDROLOGY
Editorial
AMER SOC ANDROLOGY, INC
Tipo de ruta
hibrida#verde
Access Rights
acceso abierto
Derechos de acceso
acceso abierto
Idioma
en
Identificador del recurso (Mandatado-único)
Artículo original
Versión del recurso (Recomendado-único)
versión publicada
ISSN
0196-3635
Página de inicio (Recomendado-único)
462
Página final (Recomendado-único)
468
Categoría WOS
Andrology
Andrología
Formato
pdf
Id de Web of Science
WOS:000305308700021
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