Repositorio
Institucional

Risopatron, J.

Treulen, F.

Sanchez, R.

Effects of Seminal Fluid Fractions on Plasma and Acrosome Membrane Integrity and Mitochondrial Membrane Potential Determined by Flow Cytometry in Chilled Canine Spermatozoa

WILEY

REPRODUCTION IN DOMESTIC ANIMALS

en

Depending on the mammal species, the use of seminal plasma during semen processing for cryopreservation has been found to have both beneficial and detrimental effects. This study was designed to determine the effects of the second (SF) and third [prostatic fluid, (PF)] ejaculate fractions on plasma membrane and acrosome integrity, mitochondrial membrane potential (Delta Psi m), phosphatidylserine (PS) translocation and sperm motility in chilled canine spermatozoa by flow cytometry. After pooling the second sperm-rich fraction of ejaculates from six dogs, samples for each assay were preserved at 5 degrees C for 72 h in egg yolk-TRIS extender (EYT) alone (control) or supplemented with seminal fluid from the second (EYT-SF) or third (EYT-PF) ejaculated fractions. After cold storage, groups EYT-SF and EYT-PF showed significantly higher percentages of sperm cells with an intact acrosome [68.8 +/- 1.4%, 69.6 +/- 2.6% (p < 0.01)] and intact plasma membrane [48.1 +/- 2.8%, 50.4 +/- 8.2% (p < 0.001)] than that observed in EYT [51.7 +/- 3.2% and 33.3 +/- 4.1% respectively]. Only in EYT-SF was PS translocation significantly reduced compared to EYT-PF and EYT [3.9 +/- 0.4%, 10.2 +/- 2.2% and 9.0 +/- 1.5%, respectively (p < 0.001)]. However, significantly diminished sperm motility was observed in EYT-SF and EYT-PF compared to EYT [36.8 +/- 2.1%, 35.5 +/- 2.3% and 78.4 +/- 4.7% (p < 0.001)]. No significant differences were detected in Delta Psi m (p > 0.05). In conclusion, supplementing semen extenders with seminal fluid from the second or third fractions of the ejaculate supplementation helps to preserve the integrity of the plasma and acrosome membranes along with the mitochondrial membrane potential but seems to compromise the motility of canine spermatozoa chilled for 72 h.#Dependiendo de la especie de mamífero, se ha observado que el uso de plasma seminal durante el procesamiento del semen para criopreservación tiene efectos tanto beneficiosos como perjudiciales. Este estudio se diseñó para determinar los efectos de las fracciones del segundo (SF) y tercer [líquido prostático, (PF)] eyaculado sobre la integridad de la membrana plasmática y el acrosoma, el potencial de membrana mitocondrial (ΔΨm), la translocación de fosfatidilserina (PS) y la motilidad espermática en espermatozoides caninos refrigerados mediante citometría de flujo. Tras agrupar la segunda fracción rica en espermatozoides de los eyaculados de seis perros, las muestras para cada ensayo se conservaron a 5 °C durante 72 h en un extensor de yema de huevo-TRIS (EYT) solo (control) o suplementado con líquido seminal de la segunda (EYT-SF) o tercera (EYT-PF) fracción eyaculada. Después del almacenamiento en frío, los grupos EYT-SF y EYT-PF mostraron porcentajes significativamente más altos de células espermáticas con un acrosoma intacto [68,8 +/- 1,4%, 69,6 +/- 2,6% (p < 0,01)] y membrana plasmática intacta [48,1 +/- 2,8%, 50,4 +/- 8,2% (p < 0,001)] que lo observado en EYT [51,7 +/- 3,2% y 33,3 +/- 4,1% respectivamente]. Solo en EYT-SF la translocación de PS se redujo significativamente en comparación con EYT-PF y EYT [3,9 +/- 0,4%, 10,2 +/- 2,2% y 9,0 +/- 1,5%, respectivamente (p < 0,001)]. Sin embargo, se observó una motilidad espermática significativamente disminuida en EYT-SF y EYT-PF en comparación con EYT [36,8 +/- 2,1%, 35,5 +/- 2,3% y 78,4 +/- 4,7% (p < 0,001)]. No se detectaron diferencias significativas en Delta Psi m (p > 0,05). En conclusión, la suplementación de los diluyentes de semen con líquido seminal de la segunda o tercera fracción de la suplementación del eyaculado ayuda a preservar la integridad de las membranas plasmática y acrosómica junto con el potencial de membrana mitocondrial, pero parece comprometer la motilidad de los espermatozoides caninos refrigerados durante 72 h.

Artículo original

This research was supported by the National Fund for Science and Technology of Chile, FONDECYT, Grant No1070594.

Esta investigación fue financiada por el Fondo Nacional de Ciencia y Tecnología de Chile, FONDECYT, subvención n.° 1070594.

10.1111/j.1439-0531.2012.02011.x

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ALMACENAMIENTO A LARGO PLAZO

MOTILIDAD ESPERMATOZOIDE

ESPERMATOZOIDES CANINOS

CONTROL DE CALIDAD

SEMEN DE JARABE

EXTENSOR

INSEMINACIÓN

FOSFATASAS

APOPTOSIS

GLUCOSA

LONG-TERM STORAGE

SPERM MOTILITY

DOG SPERMATOZOA

QUALITY-CONTROL

BOAR SEMEN

EXTENDER

INSEMINATION

PHOSPHATASES

APOPTOSIS

GLUCOSE

ALMACENAMIENTO A LARGO PLAZO

MOTILIDAD ESPERMATOZOIDE

ESPERMATOZOIDES CANINOS

CONTROL DE CALIDAD

SEMEN DE JARABE

EXTENSOR

INSEMINACIÓN

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SPERM MOTILITY

DOG SPERMATOZOA

QUALITY-CONTROL

BOAR SEMEN

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Effects of Seminal Fluid Fractions on Plasma and Acrosome Membrane Integrity and Mitochondrial Membrane Potential Determined by Flow Cytometry in Chilled Canine Spermatozoa

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versión publicada

ANID CONICYT FONDECYT 1070594

0936-6768

1043

1048

Agriculture, Dairy & Animal Science

Reproductive Biology

Veterinary Sciences

Agricultura, Lácteos y Ciencia Animal

Biología Reproductiva

Ciencias Veterinarias

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WOS:000310790800029