Repositorio UFRO · Omeka S

Evaluation of the acrosome reaction in human spermatozoa:: comparison of cytochemical and fluorescence techniques

Primer Autor	Sánchez, R
Co-autores	Risopatrón, J Peña, P Miska, W
Título	Evaluation of the acrosome reaction in human spermatozoa:: comparison of cytochemical and fluorescence techniques
Editorial	BLACKWELL WISSENSCHAFTS-VERLAG GMBH
Revista	ANDROLOGIA
Lenguaje	en
Resumen	The acrosome reaction, which is essential for fertilization, includes fusion and vesiculation of the plasma membrane with the outer acrosomal membrane of spermatozoa, thereby releasing the acrosomal content. Determination of the ability of spermatozoa to undergo the acrosome reaction has proved to be a useful parameter in evaluation of infertile patients. The objective of this study was to compare cytochemical techniques, such as double stain (Giemsa/trypan blue) and triple stain (Bismarck brown/rose bengal/trypan blue), with a fluorescence method using Pisum sativum agglutinin fluorescein conjugate and Hoechst dye N degrees 33258 (double fluorescence). Whereas the cytochemical methods are easy to perform in general laboratories, the fluorescence technique requires special and costly instrumentation. In semen obtained from fertile donors, spermatozoa were selected by the swim-up technique and the acrosome reaction was induced by incubation at low temperature. The percentages of vital and acrosome-reacted spermatozoa were determined after incubation at 4 degreesC and at room temperature. No statistically significant difference was found between double fluorescence (viability 86.3%, acrosome reaction 14.7%) and triple stain (viability 85.3%, acrosome reaction 17%) (P>0.05). On the other hand, the double stain technique showed different values for viability (70.3%) and acrosome reaction (42.5%) (P<0.05). In conclusion, triple stain yielded results similar to those obtained by the fluorescence technique in evaluating the acrosome reaction and can therefore easily be used in general or research laboratories. La reacción acrosómica, esencial para la fecundación, incluye la fusión y vesiculación de la membrana plasmática con la membrana acrosómica externa de los espermatozoides, liberando así el contenido acrosómico. La determinación de la capacidad de los espermatozoides para experimentar la reacción acrosómica ha demostrado ser un parámetro útil en la evaluación de pacientes infértiles. El objetivo de este estudio fue comparar técnicas citoquímicas, como la tinción doble (Giemsa/azul tripano) y la tinción triple (marrón Bismarck/rosa de bengala/azul tripano), con un método de fluorescencia utilizando un conjugado de aglutinina de Pisum sativum con fluoresceína y el colorante Hoechst N° 33258 (doble fluorescencia). Mientras que los métodos citoquímicos son fáciles de realizar en laboratorios generales, la técnica de fluorescencia requiere instrumentación especial y costosa. En el semen obtenido de donantes fértiles, los espermatozoides se seleccionaron mediante la técnica de migración ascendente y la reacción acrosómica se indujo mediante incubación a baja temperatura. Se determinaron los porcentajes de espermatozoides viables y con reacción acrosómica tras la incubación a 4 °C y a temperatura ambiente. No se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre la doble fluorescencia (viabilidad 86,3 %, reacción acrosómica 14,7 %) y la triple tinción (viabilidad 85,3 %, reacción acrosómica 17 %) (P > 0,05). Por otro lado, la técnica de doble tinción mostró valores diferentes para la viabilidad (70,3 %) y la reacción acrosómica (42,5 %) (P < 0,05). En conclusión, la triple tinción arrojó resultados similares a los obtenidos mediante la técnica de fluorescencia en la evaluación de la reacción acrosómica y, por lo tanto, puede utilizarse fácilmente en laboratorios generales o de investigación.
Tipo de Recurso	artículo original
doi	10.1046/j.1439-0272.2001.00405.x
Formato Recurso	PDF
Palabras Claves	Aglutinina de Pisum sativum técnica de triple tinción espermatozoides humanos in vitro fertilización PISUM-SATIVUM AGGLUTININ TRIPLE-STAIN TECHNIQUE HUMAN-SPERM IN-VITRO FERTILIZATION reacción acrosómica espermatozoides humanos técnica de tinción de laboratorio reproductivo acrosome reaction human spermatozoa reproductive laboratory stain technique
Ubicación del archivo	http://dx.doi.org/10.1046/j.1439-0272.2001.00405.x
Categoría OCDE	Endocrinology & Metabolism
Materias	Aglutinina de Pisum sativum técnica de triple tinción espermatozoides humanos in vitro fertilización PISUM-SATIVUM AGGLUTININ TRIPLE-STAIN TECHNIQUE HUMAN-SPERM IN-VITRO FERTILIZATION reacción acrosómica espermatozoides humanos técnica de tinción de laboratorio reproductivo acrosome reaction human spermatozoa reproductive laboratory stain technique
Disciplinas de la OCDE	Biología Reproductiva Tecnología Médica Química Médica
Versión del recurso (Recomendado-único)	version publicada
Tipo de ruta	suscripción
Access Rights	metadata
Derechos de acceso	metadata
Id de Web of Science	WOS:000168120800001
Título de la cita (Recomendado-único)	Evaluation of the acrosome reaction in human spermatozoa:: comparison of cytochemical and fluorescence techniques
Identificador del recurso (Mandatado-único)	artículo original
Editorial	BLACKWELL WISSENSCHAFTS-VERLAG GMBH
Categoría WOS	Andrology Andrología
Idioma	en
ISSN	0303-4569
Revista/Libro	ANDROLOGIA
Identificador alternativo	PMID:11350367
Página de inicio (Recomendado-único)	63
Página final (Recomendado-único)	67
Formato	PDF