Repositorio
Institucional

Tvrda, Eva

DYNAMICS OF SELECTED APOPTOTIC AND HEAT SHOCK PROTEINS IN CRYOPRESERVED AND VITRIFIED SEMEN FROM NORMOZOOSPERMIC MEN

SLOVAK UNIV AGRICULTURE NITRA

JOURNAL OF MICROBIOLOGY BIOTECHNOLOGY AND FOOD SCIENCES

en

Conventional slow freezing is the most widely used technique for sperm cryopreservation, however recently vitrification has begun to be used as an alternative. The present work aims to compare the efficiency of slow freezing and sperm vitrification in preventing changes in the levels of heat shock proteins 70 (HSP 70) and 90 (HSP 90) as well as apoptotic markers BAX, Bcl-2, caspase-3 and caspase-9 in human spermatozoa. Semen samples were obtained from 35 donors with a normal spermiogram and divided into three aliquots. The first aliquot represented the neat sample. The second fraction was used for slow freezing and the third fraction was subjected to vitrification. Each set of samples was subjected to motility assessment and protein extraction for western blot analysis. No significant differences were found in the recovered sperm motility when comparing slow cryopreservation and vitrification, however significantly lower sperm motility (P<0.01), progressive motility (P<0.01), progressive velocity (P<0.05) ad track speed (P<0.01) were found in the cryopreserved group in comparison to the neat sample. Both freezing techniques have led to a significant decrease of the HSP 70 protein levels in comparison to the neat state (P<0.001 in case of slow cryopreservation

P<0.01 with respect to vitrification). Furthermore, both techniques resulted in a significant decrease of the HSP 90 protein levels (P<0.01) when compared to neat specimens. No significant differences in HSP 90 levels were detected between the slow cryopreserved and vitrified group. In the meantime, vitrification led to significantly lower BAX (P<0.05) and caspase-9 (P<0.0001) levels in comparison to cryopreservation. Our results show that sperm vitrification is a technique that can be carried out with good post-thaw sperm vitality outcomes, primarily by providing protection to the mitochondrial system and preventing apoptosis.La congelación lenta convencional es la técnica más utilizada para la criopreservación de esperma

sin embargo, recientemente se ha comenzado a utilizar la vitrificación como alternativa. El presente trabajo tiene como objetivo comparar la eficacia de la congelación lenta y la vitrificación de esperma para prevenir cambios en los niveles de las proteínas de choque térmico 70 (HSP 70) y 90 (HSP 90), así como de los marcadores apoptóticos BAX, Bcl-2, caspasa-3 y caspasa-9 en espermatozoides humanos. Se obtuvieron muestras de semen de 35 donantes con un espermiograma normal y se dividieron en tres alícuotas. La primera alícuota representó la muestra sin tratar. La segunda fracción se utilizó para la congelación lenta y la tercera fracción se sometió a vitrificación. Cada conjunto de muestras se sometió a una evaluación de la motilidad y a la extracción de proteínas para el análisis de Western blot. No se encontraron diferencias significativas en la motilidad de los espermatozoides recuperados al comparar la criopreservación lenta y la vitrificación

sin embargo, se encontraron motilidad de espermatozoides significativamente menores (P<0,01), motilidad progresiva (P<0,01), velocidad progresiva (P<0,05) y velocidad de pista (P<0,01) en el grupo criopreservado en comparación con la muestra sin tratar. Ambas técnicas de congelación llevaron a una disminución significativa de los niveles de proteína HSP 70 en comparación con el estado sin tratar (P<0,001 en el caso de la criopreservación lenta

P<0,01 con respecto a la vitrificación). Además, ambas técnicas resultaron en una disminución significativa de los niveles de proteína HSP 90 (P<0,01) cuando se compararon con las muestras sin tratar. No se detectaron diferencias significativas en los niveles de HSP 90 entre el grupo criopreservado lento y el grupo vitrificado. Mientras tanto, la vitrificación resultó en niveles significativamente más bajos de BAX (P<0,05) y caspasa-9 (P<0,0001) en comparación con la criopreservación. Nuestros resultados demuestran que la vitrificación de espermatozoides es una técnica que puede llevarse a cabo con buenos resultados en cuanto a la vitalidad de los espermatozoides tras la descongelación, principalmente al proteger el sistema mitocondrial y prevenir la apoptosis.

artículo original

spermatozoa

cryopreservation

vitrification

heat shock proteins

apoptosis

caspases

10.55251/jmbfs.11741

pdf

CRYOPROTECTANT-FREE VITRIFICATION

HUMAN-SPERMATOZOA

PLASMA-MEMBRANE

SPERM CRYOPRESERVATION

DNA INTEGRITY

THAWED SPERM

MOTILITY

ASSOCIATION

CASPASES

FERTILIZATION

CRYOPROTECTANT-FREE VITRIFICATION

HUMAN-SPERMATOZOA

PLASMA-MEMBRANE

SPERM CRYOPRESERVATION

DNA INTEGRITY

THAWED SPERM

MOTILITY

ASSOCIATION

CASPASES

FERTILIZATION

Biología Reproductiva

Biología Molecular

Tecnología Médica

versión publicada

diamante

verde

acceso abierto

acceso abierto

WOS:001495073800001

DYNAMICS OF SELECTED APOPTOTIC AND HEAT SHOCK PROTEINS IN CRYOPRESERVED AND VITRIFIED SEMEN FROM NORMOZOOSPERMIC MEN

artículo original

SLOVAK UNIV AGRICULTURE NITRA

JOURNAL OF MICROBIOLOGY BIOTECHNOLOGY AND FOOD SCIENCES

Food Science & Technology

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1338-5178

Slovak Research and Development Agency(Slovak Research and Development Agency)#Scientific Grant Agency of the Ministry of Education, Science, Research and Sport of the Slovak Republic and Slovak Academy of Science#Slovak National Scholarship program

Slovak Research and Development Agency

Scientific Grant Agency of the Ministry of Education, Science, Research and Sport of the Slovak Republic and Slovak Academy of Science [VEGA 1/0067/24]

Slovak National Scholarship program

[APVV-21-0095]

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