Repositorio
Institucional

Zambrano, Fabiola

Methods for Detecting Neutrophil Extracellular Trap Formation: From Microscopy to High-Throughput Technologies

SOC CHILENA ANATOMIA

INTERNATIONAL JOURNAL OF MORPHOLOGY

en

Neutrophil extracellular traps (NETs) are chromatin-based structures released during NETosis, a specialized form of neutrophil cell death with essential roles in host defense and pathogenesis. While NETs aid in trapping pathogens, theirregulation dys contributes to autoimmune, inflammatory, and thrombotic disorders. Given their dual nature, the accurate detection of NETriticalsis c for both basic and clinical research. This review provides a comprehensive overview of the current and emerging methodologiessedtou detect NET formation, ranging from traditional microscopy and fluorescent DNA dyes to advanced flow cytometry, omics technologies, and machine learning-assisted platforms. Microscopy-based methods offer visual confirmation but are labor-intensive, owwhereas fl cytometry and automated imaging enable high-throughput quantification. Omics approaches, including proteomics and cs,transcriptomi reveal molecular signatures and regulatory pathways of NETosis across disease contexts. Despite these advances, challengesinrema regarding marker specificity, sample preparation artifacts, and the standardization of protocols. Future research shouldn focusintegrating multi-modal techniques and establishing robust, validated detection strategies suitable for in vivo and clinical applications.This will be key for leveraging NETs as biomarkers and therapeutic targets in infection, cancer, and immune-mediated diseases.Las trampas extracelulares de neutrófilos (NET) son estructuras basadas en cromatina que se liberan durante la NETosis, una forma especializada de muerte celular de neutrófilos con funciones esenciales en la defensa del huésped y la patogénesis. Si bien las NET ayudan a atrapar patógenos, su desregulación contribuye a trastornos autoinmunes, inflamatorios y trombóticos. Dada su naturaleza dual, la detección precisa de la NETosis es crucial tanto para la investigación básica como clínica. Esta revisión ofrece una visión general completa de las metodologías actuales y emergentes utilizadas para detectar la formación de NET, desde la microscopía tradicional y los colorantes fluorescentes de ADN hasta la citometría de flujo avanzada, las tecnologías ómicas y las plataformas asistidas por aprendizaje automático. Los métodos basados ​​en microscopía ofrecen confirmación visual, pero son laboriosos, mientras que la citometría de flujo y la obtención de imágenes automatizadas permiten una cuantificación de alto rendimiento. Los enfoques ómicos, que incluyen proteómica y transcriptómica, revelan firmas moleculares y vías reguladoras de la NETosis en diferentes contextos de enfermedad. A pesar de estos avances, persisten desafíos en cuanto a la especificidad de los marcadores, los artefactos en la preparación de muestras y la estandarización de los protocolos. La investigación futura debería centrarse en la integración de técnicas multimodales y en el establecimiento de estrategias de detección robustas y validadas, adecuadas para aplicaciones in vivo y clínicas. Esto será fundamental para aprovechar las NET como biomarcadores y dianas terapéuticas en infecciones, cáncer y enfermedades inmunomediadas.

artículo original

NETosis

Neutrophil extracellular traps

Detection methods

10.4067/s0717-95022025000401421

pdf

CELL-DEATH

NETOSIS

QUANTIFICATION

MECHANISMS

CELL-DEATH

NETOSIS

QUANTIFICATION

MECHANISMS

Inmunología

Biología Celular

Otros Temas de Medicina Básica

versión publicada

dorada

verde

acceso abierto

acceso abierto

WOS:001570693900023

Methods for Detecting Neutrophil Extracellular Trap Formation: From Microscopy to High-Throughput Technologies

artículo original

SOC CHILENA ANATOMIA

INTERNATIONAL JOURNAL OF MORPHOLOGY

Anatomy & Morphology

en

0717-9502

Universidad de La Frontera

Universidad de La Frontera [PP24-0008]

pdf