Repositorio UFRO · Omeka S

Modulation of NETosis in Swine Neutrophil-Spermatozoa Co-Cultures In Vitro: Effects of Butylated Hydroxytoluene, Albumin, Prostaglandin E2, and Seminal Plasma

Primer Autor	Sanchez, Raul
Título	Modulation of NETosis in Swine Neutrophil-Spermatozoa Co-Cultures In Vitro: Effects of Butylated Hydroxytoluene, Albumin, Prostaglandin E2, and Seminal Plasma
Editorial	MDPI
Revista	ANTIOXIDANTS
Lenguaje	en
Resumen	In swine reproduction, immune-mediated mechanisms such as neutrophil extracellular trap (NET) formation can affect sperm function and reduce fertility outcomes. This study evaluated the capacity of antioxidant and reproductive compounds-butylated hydroxytoluene (BHT), prostaglandin E-2 (PGE(2)), bovine serum albumin (BSA), and seminal plasma (SP)-to modulate NETosis in co-cultures of swine neutrophils and cryopreserved spermatozoa. NET formation was quantified by nuclear area expansion and validated by digital cytometry and immunofluorescence. BHT (0.5 mM) and PGE2 (10 mu M) produced the most significant inhibitory effects, reducing NETotic cell percentages from 34.5 +/- 2.7% (sperm-exposed controls) to 12.2 +/- 1.3% and 14.5 +/- 2.1%, respectively (p < 0.01). SP at 20% decreased NETosis to 16.8 +/- 1.8%, while BSA (0.5%) achieved a moderate reduction to 21.3 +/- 2.5%. Flow cytometry revealed reduced peroxynitrite levels in sperm treated with SP and BSA. Two NET phenotypes (aggNETs and sprNETs) were identified. BTS medium enhanced NET formation, whereas DNase I degraded NETs effectively. These findings identify porcine NETosis as a redox-sensitive pathway modulated in vitro, suggesting an immunological role in enhancing sperm preservation for swine artificial insemination.En la reproducción porcina, los mecanismos inmunomediados, como la formación de trampas extracelulares de neutrófilos (NET), pueden afectar la función espermática y reducir los resultados de fertilidad. Este estudio evaluó la capacidad de compuestos antioxidantes y reproductivos —hidroxitolueno butilado (BHT), prostaglandina E-2 (PGE(2)), albúmina sérica bovina (BSA) y plasma seminal (SP)— para modular la NETosis en cocultivos de neutrófilos porcinos y espermatozoides criopreservados. La formación de NET se cuantificó mediante la expansión del área nuclear y se validó mediante citometría digital e inmunofluorescencia. El BHT (0,5 mM) y la PGE2 (10 μM) produjeron los efectos inhibitorios más significativos, reduciendo los porcentajes de células NETóticas del 34,5 ± 2,7 % (controles expuestos a espermatozoides) al 12,2 ± 1,3 % y al 14,5 ± 2,1 %, respectivamente (p < 0,01). La SP al 20% redujo la NETosis a 16,8 ± 1,8%, mientras que la BSA (0,5%) logró una reducción moderada a 21,3 ± 2,5%. La citometría de flujo reveló niveles reducidos de peroxinitrito en los espermatozoides tratados con SP y BSA. Se identificaron dos fenotipos de NET (aggNETs y sprNETs). El medio BTS potenció la formación de NET, mientras que la DNasa I degradó eficazmente los NET. Estos hallazgos identifican la NETosis porcina como una vía sensible al estado redox modulada in vitro, lo que sugiere un papel inmunológico en la mejora de la preservación del esperma para la inseminación artificial porcina.
Tipo de Recurso	artículo original
Description	PMN NETosis spermatozoa oxidative stress antioxidants
doi	10.3390/antiox14070778
Formato Recurso	pdf
Palabras Claves	EXTRACELLULAR TRAPS FORMATION POLYMORPHONUCLEAR NEUTROPHILS NADPH OXIDASE SPERM FERTILITY
Ubicación del archivo	http://dx.doi.org/10.3390/antiox14070778
Materias	EXTRACELLULAR TRAPS FORMATION POLYMORPHONUCLEAR NEUTROPHILS NADPH OXIDASE SPERM FERTILITY
Disciplinas de la OCDE	Animales domésticos Biología Reproductiva Ciencia Animal y lechería
Versión del recurso (Recomendado-único)	versión publicada
Tipo de ruta	dorada verde
Access Rights	acceso abierto
Derechos de acceso	acceso abierto
Id de Web of Science	WOS:001551107200001
Título de la cita (Recomendado-único)	Modulation of NETosis in Swine Neutrophil-Spermatozoa Co-Cultures In Vitro: Effects of Butylated Hydroxytoluene, Albumin, Prostaglandin E2, and Seminal Plasma
Identificador del recurso (Mandatado-único)	artículo original
Editorial	MDPI
Revista/Libro	ANTIOXIDANTS
Categoría WOS	Biochemistry & Molecular Biology Chemistry, Medicinal Food Science & Technology
Idioma	en
License	CC BY 4.0
Condición de la licencia (Recomendado-repetible)	CC BY 4.0
Entidad financiadora	Fundacion de Apoyo a la Investigacion del Estado de Sao Paulo (FAPESP)#Brazil y la Universidad de La Frontera (UFRO), Chile#Universidad de La Frontera#National Council for Scientific and Technological Development, Brazil (CNPq)(Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientifico e Tecnologico (CNPQ))
Referencia del Financiador (Mandatado si es aplicable-repetible)	Fundacion de Apoyo a la Investigacion del Estado de Sao Paulo (FAPESP) Brazil y la Universidad de La Frontera (UFRO), Chile [FPP22-0022, FAPESP 2022/09573-2] Universidad de La Frontera [PP24-0008] National Council for Scientific and Technological Development, Brazil (CNPq) [310486/2023-8]
Formato	pdf