Repositorio UFRO · Omeka S

Sperm cryopreservation with supplementation of α-tocopherol and ascorbic acid in freezing media increase sperm function and fertility rate in Atlantic salmon (Salmo salar)

Primer Autor	Oliveira, R. P. S.
Co-autores	Figueroa, E. Farias, J. G. Lee-Estevez, M. Valdebenito, I Risopatron, J. Magnotti, C. Romero, J. Watanabe, I
Título	Sperm cryopreservation with supplementation of α-tocopherol and ascorbic acid in freezing media increase sperm function and fertility rate in Atlantic salmon (Salmo salar)
Editorial	ELSEVIER SCIENCE BV
Revista	AQUACULTURE
Lenguaje	en
Resumen	The use of alpha-tocopherol and ascorbic acid in freezing medium prevents lipoperoxidation and damage by ROS (reactive oxygen species), however, the effects of these antioxidants in salmonid spermatozoa have not been studied. In this work the protective effects of antioxidants on the enzymatic activity and fertilization capacity of frozen Atlantic salmon spermatozoa were studied. Spermatozoa were frozen in Cortland (R) medium supplemented with 1.3 M DMSO, 0.3 M glucose, 2% BSA and different concentrations of alpha-tocopherol and ascorbic acid, spermatozoa frozen without antioxidants were used as control and fresh sperm. Samples loaded in 0.5 ml plastic straws were frozen at 68 degrees C/min (Freeze Control (R)). Thawing was carried out at 35 degrees C and post-thawing lipid peroxidation (LPO) was evaluated along with Glutathione (GSH/GSSG) levels, and Glutathione peroxidase (GPx) and Catalase (CAT) activity. Additionally, percentage of motility, mitochondrial membrane potential (ATM), and fertilization rate were assessed. Results showed significantly lower LPO values (expressed as malondialdehyde concentration) in spermatozoa cryopreserved with alpha-tocopherol (0.1 mM and 0.5 mM) and with combinations of alpha-tocopherol/ascorbic acid (0.1 mM/1.0 mM and 0.5 mM/10 mM ratios) (p < .05). Moreover, spermatozoa frozen with alpha-tocopherol/ascorbic acid also exhibited significantly higher GPx and CAT activity as well as GSH/GSSG ratio compared to controls (p < .05). The production of O-2(i)- also decreased with the combined treatment, however, no statistically significant difference was found compared to controls. Consistently with the improvement in antioxidant defences, the percentage of motility and Delta Psi M were highest and significantly different in spermatozoa cryopreserved with alpha-tocopherol/ascorbic acid 0.1 mM/1.0 mM compared to controls, supporting the significantly higher fertilization rate exhibited by spermatozoa under the same treatment. El uso de alfa-tocoferol y ácido ascórbico en el medio de congelación previene la lipoperoxidación y el daño por ROS (especies reactivas de oxígeno) sin embargo, no se han estudiado los efectos de estos antioxidantes en espermatozoides de salmónidos. En este trabajo se estudiaron los efectos protectores de los antioxidantes sobre la actividad enzimática y la capacidad de fertilización de espermatozoides congelados de salmón del Atlántico. Los espermatozoides se congelaron en medio Cortland (R) suplementado con 1,3 M DMSO, 0,3 M glucosa, 2% BSA y diferentes concentraciones de alfa-tocoferol y ácido ascórbico los espermatozoides congelados sin antioxidantes se utilizaron como control y esperma fresco. Las muestras cargadas en pajitas de plástico de 0,5 ml se congelaron a 68 °C/min (Control de Congelación (R)). La descongelación se realizó a 35 grados C y se evaluó la peroxidación lipídica (LPO) posterior a la descongelación junto con los niveles de glutatión (GSH/GSSG) y la actividad de glutatión peroxidasa (GPx) y catalasa (CAT). Además, se evaluó el porcentaje de motilidad, el potencial de membrana mitocondrial (ATM) y la tasa de fertilización. Los resultados mostraron valores significativamente menores de LPO (expresados como concentración de malondialdehído) en espermatozoides criopreservados con alfa-tocoferol (0,1 mM y 0,5 mM) y con combinaciones de alfa-tocoferol/ácido ascórbico (proporciones 0,1 mM/1,0 mM y 0,5 mM/10 mM) (p < .05). Además, los espermatozoides congelados con alfa-tocoferol/ácido ascórbico también exhibieron actividad de GPx y CAT significativamente mayor, así como la proporción GSH/GSSG en comparación con los controles (p < .05). La producción de O-2(i)- también disminuyó con el tratamiento combinado sin embargo, no se observó una diferencia estadísticamente significativa en comparación con los controles. En consonancia con la mejora de las defensas antioxidantes, el porcentaje de motilidad y la Delta Psi M fueron mayores y significativamente diferentes en los espermatozoides criopreservados con alfa-tocoferol/ácido ascórbico 0,1 mM/1,0 mM en comparación con los controles, lo que respalda la tasa de fertilización significativamente mayor que mostraron los espermatozoides con el mismo tratamiento.
Tipo de Recurso	Artículo original
Description	Este trabajo fue apoyado por el Fondo de Promoción del Desarrollo Científico y Tecnológico de CONICYT, FONDECYT/POSTDOCTORAL (N° 3180765) y FONDECYT/REGULAR (N° 1180387) Chile, y las empresas AquaGen Chile S.A. y Hendrix Genetics S.A. que proporcionaron los gametos utilizados en los bioensayos. This work was supported by the Fund for the Promotion of Scientific and Technological Development of CONICYT, FONDECYT/POSTDOCTORAL (No 3180765) and FONDECYT/REGULAR (No 1180387) Chile, and the companies AquaGen Chile S.A. and Hendrix Genetics S.A. which provided the gametes used in the biotests.
doi	10.1016/j.aquaculture.2018.04.046
Formato Recurso	pdf
Palabras Claves	Salmo salar Spermatozoa Cryopreservation Antioxidant defences alpha-tocopherol Ascorbic acid salmo salar Espermatozoide criopreservación Defensas antioxidantes alfa-tocoferol ácido ascórbico
Ubicación del archivo	http://dx.doi.org/10.1016/j.aquaculture.2018.04.046
Categoría OCDE	Fisheries# Marine & Freshwater Biology
Materias	Salmo salar Spermatozoa Cryopreservation Antioxidant defences alpha-tocopherol Ascorbic acid salmo salar Espermatozoide criopreservación Defensas antioxidantes alfa-tocoferol ácido ascórbico
Disciplinas de la OCDE	Pesca Biología Reproductiva Bioquímica
Versión del recurso (Recomendado-único)	version publicada
Tipo de ruta	hibrida verde
Access Rights	metadata
Derechos de acceso	metadata
Id de Web of Science	WOS:000432906800001
Título de la cita (Recomendado-único)	Sperm cryopreservation with supplementation of α-tocopherol and ascorbic acid in freezing media increase sperm function and fertility rate in Atlantic salmon (Salmo salar)
Identificador del recurso (Mandatado-único)	Artículo original
Editorial	ELSEVIER SCIENCE BV
Revista/Libro	AQUACULTURE
Categoría WOS	Pesca Biología marina y de agua dulce
ISSN	0044-8486
Idioma	en
Referencia del Financiador (Mandatado si es aplicable-repetible)	ANID CONICYT FONDECYT/POSTDOCTORAL 3180765 ANID FONDECYT/REGULAR 1180387 AquaGen Chile S.A. Hendrix Genetics S.A.
Descripción	This work was supported by the Fund for the Promotion of Scientific and Technological Development of CONICYT, FONDECYT/POSTDOCTORAL (No 3180765) and FONDECYT/REGULAR (No 1180387) Chile, and the companies AquaGen Chile S.A. and Hendrix Genetics S.A. which provided the gametes used in the biotests.
Formato	pdf
Página de inicio (Recomendado-único)	1
Página final (Recomendado-único)	8
Entidad financiadora	ANID CONICYT FONDECYT/POSTDOCTORAL 3180765#ANID FONDECYT/REGULAR 1180387#AquaGen Chile S.A.#Hendrix Genetics S.A.