Repositorio UFRO · Omeka S

Free fatty acids reduce metabolic stress and favor a stable production of heterologous proteins in Pichia pastoris

Primer Autor	Farias, Jorge G.
Co-autores	Zepeda, Andrea B. Figueroa, Carolina A. Pessoa, Adalberto
Título	Free fatty acids reduce metabolic stress and favor a stable production of heterologous proteins in Pichia pastoris
Editorial	SOC BRASILEIRA MICROBIOLOGIA
Revista	BRAZILIAN JOURNAL OF MICROBIOLOGY
Lenguaje	en
Resumen	The growth of yeasts in culture media can be affected by many factors. For example, methanol can be metabolized by other pathways to produce ethanol, which acts as an inhibitor of the heterologous protein production pathway, oxygen concentration can generate aerobic or anaerobic environments and affects the fermentation rate, and temperature affects the central carbon metabolism and stress response protein folding. The main goal of this study was determine the implication of free fatty acids on the production of heterologous proteins in different culture conditions in cultures of Pichia pastoris. We evaluated cell viability using propidium iodide by flow cytometry and thiobarbituric acid reactive substances to measure cell membrane damage. The results indicate that the use of low temperatures and low methanol concentrations favors the decrease in lipid peroxidation in the transition phase from glycerol to methanol. In addition, a temperature of 14 degrees C + 1%M provided the most stable viability. By contrast, the temperature of 18 degrees C+ 1.5%M favored the production of a higher antibody fragment concentration. In summary, these results demonstrate that the decrease in lipid peroxidation is related to an increased production of free fatty acids. (C) 2018 Sociedade Brasileira de Microbiologia. Published by Elsevier Editora Ltda. El crecimiento de levaduras en medios de cultivo puede verse afectado por numerosos factores. Por ejemplo, el metanol puede metabolizarse por otras vías para producir etanol, que actúa como inhibidor de la vía de producción de proteínas heterólogas la concentración de oxígeno puede generar ambientes aeróbicos o anaeróbicos y afectar la velocidad de fermentación y la temperatura afecta el metabolismo del carbono central y el plegamiento de proteínas en respuesta al estrés. El objetivo principal de este estudio fue determinar la implicación de los ácidos grasos libres en la producción de proteínas heterólogas en diferentes condiciones de cultivo en cultivos de Pichia pastoris. Se evaluó la viabilidad celular utilizando yoduro de propidio por citometría de flujo y sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico para medir el daño a la membrana celular. Los resultados indican que el uso de bajas temperaturas y bajas concentraciones de metanol favorece la disminución de la peroxidación lipídica en la fase de transición de glicerol a metanol. Además, una temperatura de 14 °C + 1 %M proporcionó la viabilidad más estable. Por el contrario, la temperatura de 18 °C + 1,5 %M favoreció la producción de una mayor concentración de fragmentos de anticuerpos. En resumen, estos resultados demuestran que la disminución de la peroxidación lipídica está relacionada con una mayor producción de ácidos grasos libres. (C) 2018 Sociedade Brasileira de Microbiologia. Publicado por Elsevier Editora Ltda.
Tipo de Recurso	Artículo original
Description	Los autores agradecen el apoyo financiero de la beca doctoral de la Comisión Nacional de Investigación Científica y Tecnológica de Chile (CONICYT) otorgada a CFT y AZP (Chile), y la beca 2012/50210-9 de la FAPESP (Fundación de Apoyo a la Investigación Científica de São Paulo, Brasil) (AP y JGF). Ninguno de los autores tiene ningún conflicto de intereses en relación con el manuscrito. The authors acknowledge the financial support of the Comision Nacional de Investigacion Cientifica y Tecnologica de Chile (CONICYT) doctoral fellowship awarded to CFT and AZP (Chile), and 2012/50210-9 FAPESP (Sao Paulo Research Foundation, Brazil) (AP and JGF). None of the authors have any conflict of interest in the manuscript.
doi	10.1016/j.bjm.2018.03.008
Formato Recurso	pdf
Palabras Claves	Lipid peroxidation Pyruvate pathway Yeast Peroxidación lipídica Vía del piruvato Levadura
Ubicación del archivo	http://dx.doi.org/10.1016/j.bjm.2018.03.008
Categoría OCDE	Microbiology
Materias	Lipid peroxidation Pyruvate pathway Yeast Peroxidación lipídica Vía del piruvato Levadura
Disciplinas de la OCDE	Biotecnología Industrial Microbiología Bioquímica
Versión del recurso (Recomendado-único)	version publicada
Tipo de ruta	hibrida verde
Access Rights	acceso abierto
Derechos de acceso	acceso abierto
Id de Web of Science	WOS:000447893000022
Título de la cita (Recomendado-único)	Free fatty acids reduce metabolic stress and favor a stable production of heterologous proteins in Pichia pastoris
Identificador del recurso (Mandatado-único)	Artículo original
Editorial	SOC BRASILEIRA MICROBIOLOGIA
Revista/Libro	BRAZILIAN JOURNAL OF MICROBIOLOGY
Categoría WOS	Microbiología
ISSN	1517-8382
Idioma	en
Referencia del Financiador (Mandatado si es aplicable-repetible)	ANID CONICYT doctoral FAPESP 2012/50210-9
Descripción	The authors acknowledge the financial support of the Comision Nacional de Investigacion Cientifica y Tecnologica de Chile (CONICYT) doctoral fellowship awarded to CFT and AZP (Chile), and 2012/50210-9 FAPESP (Sao Paulo Research Foundation, Brazil) (AP and JGF). None of the authors have any conflict of interest in the manuscript.
Formato	pdf
License	CC BY-NC-ND 4.0
Página de inicio (Recomendado-único)	856
Página final (Recomendado-único)	864
Condición de la licencia (Recomendado-repetible)	CC BY-NC-ND 4.0
Entidad financiadora	ANID CONICYT doctoral#FAPESP 2012/50210-9