Repositorio UFRO · Omeka S

Cryopreservation induces mitochondrial permeability transition in a bovine sperm model

Primer Autor	Felmer, Ricardo
Co-autores	Treulen, Favian Arias, Maria Elena Aguila, Luis Uribe, Pamela
Título	Cryopreservation induces mitochondrial permeability transition in a bovine sperm model
Editorial	ACADEMIC PRESS INC ELSEVIER SCIENCE
Revista	CRYOBIOLOGY
Lenguaje	en
Resumen	When the mitochondria of somatic cells are exposed to pathological calcium overload, these trigger mitochondrial permeability transition (MPT) leading to mitochondrial dysfunction and cell death. Cryopreservation procedures expose mammalian spermatozoa to physical and chemical stressors, which affect plasma membrane integrity and induce a pathological calcium overload that gradually promotes loss of sperm quality and ultimately function. Although several studies highlight the role of calcium in many physiological and pathological processes, the MPT induced by an intracellular calcium increase and its effect on the cell quality of mammalian spermatozoa are unknown. The aim of this study was to evaluate the effects of cryopreservation on MPT and its relationship with the deterioration of sperm quality in a bovine model. To do this, frozen bovine spermatozoa were thawed and adjusted to 2 x 10(6)mL(-1) and incubated for 4hat 38 degrees C. Using flow cytometry, we evaluated MPT by the calcein-AM and cobalt chloride method, intracellular Ca2+ level using FLU03-AM, plasma membrane integrity by exclusion of propidium iodide, mitochondrial membrane potential (Delta Omega m) with tetramethylrhodamine methyl ester perchlorate and intracellular ROS production with dihydroethidium. ATP levels were assessed by a chemiluminiscent method. The results showed that thawed spermatozoa trigger MPT associated with an intracellular calcium increase and that this was accompanied by Delta Omega m dissipation, decrease of ATP levels and ROS production, and deterioration of plasma membrane integrity. In conclusion, cryopreservation induces MPT and this is associated with a loss of sperm quality. Cuando las mitocondrias de las células somáticas se exponen a una sobrecarga patológica de calcio, se desencadena la transición de la permeabilidad mitocondrial (TPM), lo que provoca disfunción mitocondrial y muerte celular. Los procedimientos de criopreservación exponen a los espermatozoides de mamíferos a factores de estrés físico y químico, que afectan la integridad de la membrana plasmática e inducen una sobrecarga patológica de calcio que gradualmente promueve la pérdida de la calidad espermática y, en última instancia, de su función. Si bien varios estudios destacan el papel del calcio en numerosos procesos fisiológicos y patológicos, se desconoce la TPM inducida por un aumento de calcio intracelular y su efecto sobre la calidad celular de los espermatozoides de mamíferos. El objetivo de este estudio fue evaluar los efectos de la criopreservación sobre la TPM y su relación con el deterioro de la calidad espermática en un modelo bovino. Para ello, se descongelaron espermatozoides bovinos congelados, se ajustaron a 2 x 10(6)mL(-1) y se incubaron durante 4hat 38 grados C. Mediante citometría de flujo, evaluamos la MPT mediante el método de calceína-AM y cloruro de cobalto, el nivel intracelular de Ca2+ mediante FLU03-AM, la integridad de la membrana plasmática mediante exclusión de yoduro de propidio, el potencial de membrana mitocondrial (Delta Omega m) con perclorato de éster metílico de tetrametilrodamina y la producción intracelular de ROS con dihidroetidio. Los niveles de ATP se evaluaron mediante un método de quimioluminiscencia. Los resultados mostraron que los espermatozoides descongelados desencadenan MPT asociado con un aumento de calcio intracelular y que esto se acompañó de disipación de Delta Omega m, disminución de los niveles de ATP y producción de ROS, y deterioro de la integridad de la membrana plasmática. En conclusión, la criopreservación induce MPT y esto se asocia con una pérdida de calidad espermática.
Tipo de Recurso	Artículo original
Description	Este trabajo fue financiado por una beca postdoctoral FONDECYT 3160214 CONICYT-Chile, y FONDECYT 1160467, CONICYT-Chile. This work was supported by a Postdoctoral fellowship FONDECYT 3160214 CONICYT-Chile, and FONDECYT 1160467, CONICYT-Chile.
doi	10.1016/j.cryobiol.2018.06.001
Formato Recurso	pdf
Palabras Claves	Bovine Calcium Cryopreservation Mitochondria Sperm Bovino Calcio criopreservación mitocondrias Esperma
Ubicación del archivo	http://dx.doi.org/10.1016/j.cryobiol.2018.06.001
Categoría OCDE	Biology# Physiology
Materias	Bovine Calcium Cryopreservation Mitochondria Sperm Bovino Calcio criopreservación mitocondrias Esperma
Disciplinas de la OCDE	Biología Reproductiva Ciencia Animal y lechería Biología Celular
Versión del recurso (Recomendado-único)	version publicada
Tipo de ruta	hibrida verde
Access Rights	metadata
Derechos de acceso	metadata
Id de Web of Science	WOS:000441368600010
Título de la cita (Recomendado-único)	Cryopreservation induces mitochondrial permeability transition in a bovine sperm model
Identificador del recurso (Mandatado-único)	Artículo original
Editorial	ACADEMIC PRESS INC ELSEVIER SCIENCE
Revista/Libro	CRYOBIOLOGY
Categoría WOS	Biología Fisiología
ISSN	0011-2240
Idioma	en
Referencia del Financiador (Mandatado si es aplicable-repetible)	ANID CONICYT FONDECYT 3160214 ANID FONDECYT 1160467
Descripción	This work was supported by a Postdoctoral fellowship FONDECYT 3160214 CONICYT-Chile, and FONDECYT 1160467, CONICYT-Chile.
Formato	pdf
Página de inicio (Recomendado-único)	65
Página final (Recomendado-único)	74
Entidad financiadora	ANID CONICYT FONDECYT 3160214#ANID FONDECYT 1160467